訂購(gòu)信息：
 產(chǎn)品名稱：乙型腦炎病毒核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)
規(guī)格：50T
編號(hào)：BH-P96581
分類：熒光PCR法
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；
◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

準(zhǔn)備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份
使用及效果：
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
牛腎細(xì)胞;MDBK(BVDV-free)（）Methimazole含量測(cè)定

小鼠肉瘤瘤株;S180 小鼠表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL枸櫞酸氯米芬（）Clomiphene 含量測(cè)定

羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞 Human甲磺酸雙氫毒堿（）Dihydroergotoxine mesylate含量測(cè)定

TNFRSF25 Others Human  TNFRSF25 / DDR3 / APO3 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 6-醛基異麥冬黃烷酮A()6-Aldehydoisoophiopogonanone AHPLC≥98%,

前列腺上皮細(xì)胞HPEpiC（）Chlorprothixene檢查
CN3 Others Mouse 小鼠 Coactin 3 / CN3 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 刺芒柄花素>98%,BRFormononetin

大鼠晶狀體上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL大豆素,(）HPLC>98%,分析Daidzein

EB (NBL-4)牛胚氣管細(xì)胞 EB (NBL-4) of bovine embryo acheal cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS巴馬汀氯化物一水合物(分析)分析Palmatine chloride hydrate

IL36G Protein Mouse 重組小鼠 IL36G / IL1F9 蛋白 (His 標(biāo)簽)BSA[=N,O-雙(基硅基)乙酰胺](>75.0%(GC))>75.0%(GC)N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamide

NCI-H446(小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 HeLa(細(xì)胞)BSTFA[=N,O-雙(基硅基)三氟代乙酰胺](>95.0%(GC),用于氣相色譜)
乙型腦炎病毒核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)NCI-H209 小細(xì)胞肺癌細(xì)胞O-去甲美國(guó)進(jìn)口O-Desmethyl Carvedilol

GH3, 大鼠垂體生長(zhǎng)激素腺瘤4'-羥苯基美國(guó)進(jìn)口4'-Hydroxyphenyl Carvedilol

大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(S)-(-)-5'-芐氧基苯基美國(guó)進(jìn)口(S)-(-)-5'-Benzyloxyphenyl Carvedilol

惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92 [NK92] 胰島β細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL(R)-(+)-O-去甲美國(guó)進(jìn)口(R)-(+)-O-Desmethyl Carvedilol

永生化細(xì)胞;CNLMG-B5537LC5-甲基胞嘧啶 >98%,BR5-methylcytosine
檢測(cè)步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照)，每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。