實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

產(chǎn)品及特點(diǎn)：
本產(chǎn)品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液，濃度為2×。具有快速簡便、靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)，可大限度的減少人為誤差。使用時(shí)只需加入DNA模板和引物既可。使用方便快捷，能避免PCR操作過程中的污染，使用時(shí)只需取適量2×TaqPCR MasterMix溶液，加入模板和引物，并加入去離子水補(bǔ)足體積，使MasterMix溶液濃度為1×即可進(jìn)行反應(yīng)。使用前請保證充分溶解并混勻，操作需在冰上進(jìn)行。本產(chǎn)品就是為此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)的試劑盒。
具有高靈敏度、高特異性、高穩(wěn)定性
可在同一個(gè)管子中高特異性的執(zhí)行cDNA合成與基于探針的qPCR反應(yīng)。更多優(yōu)點(diǎn)如1.的特異性；2.多重反應(yīng)（高通量）；3.反應(yīng)體系配置，無需冰塊；4.無懼高GC含量PCR；5.預(yù)防交叉污染；6.廣泛的設(shè)備兼容性。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-71酸氫二鈉七水 phosphate, dibasic, heptahydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

SW-13細(xì)胞，腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞 色素瘤,Bowes Melama細(xì)胞 人肺癌細(xì)胞;A549 [A-549]dATP溶液(100 mM)dATP 100 mM solution質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR

小鼠肝癌瘤株;H22癸酸鈉 decaate質(zhì)量規(guī)格：>99%,進(jìn)分

SPARC Others Human 人 SPARC / Osteonectin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 瓊脂糖(美侖電泳級)Agarose質(zhì)量規(guī)格：美侖，電泳級

人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Daoy瓊脂糖(Sigma)Agarose質(zhì)量規(guī)格：Sigma原裝
腸平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)福美斯坦質(zhì)量規(guī)格：>99%Formestane

Hep3B細(xì)胞，肝癌細(xì)胞 人Hela細(xì)胞耐藥亞株(Hela/DDP),Hela細(xì)胞 人羊膜上皮細(xì)胞cDNAHAmEpiC cDNA福美斯坦(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品Formestane

恒河猴胚腎細(xì)胞;FRhK-4 [FRhK4]鹽酸多佐胺；鹽酸杜塞酰胺（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Dorzolamide HCl

CSF3R Others Human 人 CD114 / G-CSFR / GCSFR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRDoxazosin Mesylate

大鼠垂體瘤細(xì)胞;GH3（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Doxazosin Mesylate
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品,還原型Glutathione (Reduced)

CL-0338G1(發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞)5×106cells/瓶×2（氧化型）質(zhì)量規(guī)格：度大于98%,BRGlutathione(Oxidized)

ESAM Others Mouse 小鼠 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) DL-異質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRDL-Isoleucine

小鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mLL--γ-芐酯質(zhì)量規(guī)格：0.98L-Glutamic acid γ-benzyl ester

Eca-109人食管癌細(xì)胞 Human esophageal cancer cell line Eca-109. 1640+10% FBSL-苯芐酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：0.98L-Phenylalanine benzyl ester
漏蘆探針法PCR鑒定試劑盒保存人小腦顆粒細(xì)胞HCGC2-(2-羥苯基)苯并惡唑(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)2-(2-Hydroxyphenyl)benzoxazole

CD276 Others Human 人 CD276 / B7-H3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5,6-二溴-2,1,3-苯并噻二唑(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)5,6-Dibromo-2,1,3-benzothiadiazole

L929 小鼠成纖維細(xì)胞2-(2-羥苯基)苯并噻唑(>98.0%(HPLC)