在做ELISA實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，所采集的標(biāo)本大多都需要溶解稀釋后才能用來做實(shí)驗(yàn)。有的ELISA試劑盒里說明書上有寫標(biāo)本的溶解及稀釋比例，這樣您就可以直接通過比例進(jìn)行稀釋，但是有的說明書上并沒有寫稀釋比例，那樣您就只有自己去摸索找尋較為合適的溶解及稀釋比例！
一、ELISA試劑盒溶解
?。?）粉末規(guī)范品時(shí)間短離心，讓因運(yùn)送沾到管蓋、管壁的規(guī)范品沉到管底。
?。?）依據(jù)瓶標(biāo)簽參加必定體積的蒸餾水，加水后輕柔渦旋震動(dòng)，室溫靜置溶解10-30分鐘，讓粉末*溶解。
留意：加水后暫不必移液槍吹吸，防止蛋白未溶解，槍頭帶出部分蛋白，待*溶解后可吹吸或渦旋振動(dòng)混勻。
二、ELISA試劑盒規(guī)范品梯度稀釋:
?。?）耗材預(yù)備：預(yù)備8個(gè)1.5Ml離心管，寫上S1-S7、空白。
?。?）規(guī)范品稀釋液的挑選：若血清、血漿、安排勻漿樣本，用試劑盒中的規(guī)范品稀釋液，梯度稀釋規(guī)范品。若細(xì)胞上清樣本，主張用細(xì)胞培養(yǎng)基梯度稀釋規(guī)范品。
?。?）梯度稀釋：依據(jù)說明書，每管參加等體積的規(guī)范品稀釋液（培養(yǎng)基）。汲取同體積溶解好的規(guī)范品到S1管中，吹打10次混勻，渦旋5S。從S1管中汲取同體積溶液到S2管，吹打10次混勻，渦旋5s。同法稀釋S3-S7濃度。
（4）空白: ELISA試劑盒規(guī)范品稀釋液（培養(yǎng)基）作為空白即零濃度。
留意：梯度稀釋規(guī)范品時(shí)，渦旋震動(dòng)混勻后可時(shí)間短離心，讓到蓋子、壁上的液體到管底，再開始稀釋下個(gè)濃度。規(guī)范品溶解、梯度稀釋是ELISA試驗(yàn)要害點(diǎn)，按以上辦法梯度稀釋就可！
